Domeniul de aplicare al sistemului de stratificare prin cromatografie lichidă de presiune scăzută: cercetare și pregătire în biochimie, chimie sintetică, produse naturale, dezvoltare de medicamente, chimie alimentară, chimie agrochimică, produse cosmetice, polimeri și petrochimie. Se poate efectua stratalizare de schimb ionic, stratalizare de afinitate, stratalizare de filtrare de gel, hidrofobie și alte metode, utilizate pentru proteine, enzime, acizi nucleici, nucleotide, polipeptide, (cu / fără aminoacizi aromatici) și orice altă analiză de separare a probelor biologice / non-biologice absorbite de ultraviolete, detectarea fluxului, este o alegere ideală pentru purificarea biomoleculelor, are mai multe funcții, ușurință de utilizare și alte caracteristici economice. Design compact pentru a economisi maxim spațiul pentru depozite rece și laborator.

Observaţii

Cerințele indicatorilor tehnici ale detectorului UV cu fascicule duble de înaltă performanță în configurația sistemului sunt utilizate pentru testarea cantitativă a fabricilor farmaceutice din întreaga țară. Caracteristici instrumente

Determinarea lungimii de undă dublă a proteinelor 280nm/254nm

Moleculele de proteine conțin aminoacizi aromatici, cum ar fi tiroina și tranina cu legături duble conjugate. Ele au proprietățile de absorbție a luminii ultraviolete, vârful lor de absorbție la lungimea de undă 280 nm, iar valoarea densității optice a vârfului absorbit în această lungime de undă este proporțională cu concentrația sa, prin urmare, poate fi folosită ca bază pentru calificarea și măsurarea cantitativă a proteinelor, din acest motiv, absorbția ultravioletă la 280nm este de obicei utilizată pentru monitorizarea continuă a concentrației de proteine în sistemul de stratificare. Cu toate acestea, deoarece conținutul de tiroină și tranină din diferite proteine diferă, pentru a determina cantitatea exactă, este necesar să se compară proteina pură ca standard sau să se cunoască deja factorul de atenuare a luminii ca referință. În plus, o mulțime de substanțe non-proteinoase au, de asemenea, o capacitate de absorbție determinată la lungimi de undă de 280 nm, ceea ce poate provoca interferențe. Acestea sunt mai grave în special în cazul acizilor nucleici (purine și pirimidine). Absorbția la 280nm este de 10 ori mai puternică (pe gram) decât proteinele, dar

Acidul nucleic este mai absorbit la 254nm, iar vârful său de absorbție se află în apropierea 254nm. Coeficientul de atenuare a luminii la 254nm este de două ori mai mare decât la 280nm, în timp ce proteinele, dimpotrivă, absorb ultraviolete la 280nm mai mult decât la 254nm.

De obicei.

Raportul de absorbţie a luminii pentru proteine pure: A280/A254 1,8

Raportul de absorbţie a luminii pentru acidul nucleic pur: A280/A254 0,5

Prin urmare, atunci când acidul nucleic este prezent simultan în soluția de proteine (ceea ce este cazul în majoritatea sistemelor biologice), OD254nm trebuie determinat simultan cu OD280nm. Apoi, în funcție de raportul dintre absorbția celor două lungimi de undă, conținutul real de proteine a fost calculat prin formula empirică pentru a elimina efectul acidului nucleic.

Concentrația proteinelor: 1,45 x A280 – 0,74 x A254 (mg/ml)

Această formulă empirică a fost stabilită prin intermediul unei serii de date determinate de un amestec de proteine (enolorizază de drojdie) și de acizi nucleici (nucleic acid de drojdie) în proporții cunoscute de concentrații diferite.

Configurarea sistemului